超声波提取斑蝥素的可行性研究
【摘要】 目的 探讨用超声波提取斑蝥素的可行性。方法 在稀NaOH溶液中，用800kHz超声波提取斑蝥素45min(30min+15min)，比较其与煎煮法90min(60min+30min)提取率的差别。结果 超声法提取斑蝥素克服了煎煮法一些缺点，且并不影响斑蝥素的提取率(P>0.05)。结论 超声提取法优于煎煮提取法。
关键词 斑蝥素 超声提取法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)22-3059-02
Possibility of Catharidin’s extraction by ultrasound
Mei Qinghua，Lin Zhuangmin
177Hospital of Chinese PLA，Guangzhou510317.
, http://www.100md.com
【Abstract】 Objective To study the possibility of Catharidin’s extraction by ultrosound.Methods NaOH solution as solvent，the extractive rate of Catharidin by800kHz irradiation45min(30min+15min)was compared with by reflux method extraction90min(60min+30min).Results Some mistakes of reflux method was overcomed while the extrative rate no changed(P>0.05).Conclusion Ultrasonic extraction was much better than reflux method.Key words catharidin ulrasonic extraction
斑蝥是我国中药中最早被发现有抗癌作用的药物，其活性成分为斑蝥素，它对多种癌细胞有较强的抑制和破坏作用。有人用低浓度NaOH溶液煎煮处理来提取斑蝥素获得成功 [1] ，由于该法缺点甚多，故笔者对超声波提取斑蝥素的可行性进行了实验研究。
, http://www.100md.com
1 仪器与试剂
JY92-Ⅱ型超声波细胞粉碎机:宁波新芝科器有限公司;岛津GC-14B，C-R7A气相色谱仪;斑蝥:经广州中医药大学鉴定的南方大斑蝥;NaOH、丙酮为分析纯;色谱用试剂均为色谱纯。
2 方法与结果
2.1 斑蝥素的提取
2.1.1 超声提取法 称取斑蝥10g，置入10倍量0.5%NaOH溶液中。将超声波发生器之换能器插入其中，用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用。同法再作两份。
2.1.2 煎煮法 取斑蝥10g，在10倍量0.5%NaOH溶液中浸泡30min，加热至100℃提取60min，滤过，残渣再用同法提取30min，滤过，合并，将滤液浓缩成每10ml相当1g生药备用。共作三份。
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2.2 含量测定方法
2.2.1 色谱条件 CBP-1(25m×0.25mmI.D)色谱柱，氢火焰离子化检测器，N 2 (20ml/min，130kPa)，H 2 (65kPa)，AIR(65kPa)，柱温:170℃，进样口温度:210℃，检测器温度:250℃。
2.2.2 对照品溶液配制 精密称取斑蝥素对照品6mg于5ml容量瓶中加丙酮定容，得浓度为1.2mg/ml的对照品溶液。
2.2.3 供制品溶液制备 精密吸取斑蝥素提取液10ml，HCl调至pH2，氯仿萃取三次(20ml，15ml，15ml)合并氯仿液，水浴蒸干，残渣丙酮溶解，定容至1ml即得。
2.2.4 含量测定 取对照品溶液0.8μl，供试液2μl，进行气相色谱分析，外标法计算含量(斑蝥素保留时间约5.85min)，见表1。
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表1 斑蝥素提取率 (%)
3 讨论
超声波对不同物态的穿透性存在很大差别，实验证明，若在同样条件下使超声波强度衰减一半，需穿透液体的距离较穿透空气的距离大1000倍 [2] 。也就是说，超声波对液态穿透能力强，其能量在液态中不易被吸收;对气态穿透能力差，其能量在气体中极易被吸收。根据超声波的这一特性可将其用于斑蝥素的提取，由于超声波所具备的巨大能量几乎不为溶媒所吸收，当遇到斑蝥虫体内的孔隙时，能量便大量释放，使斑蝥虫体裂解，细胞破坏，斑蝥素被溶剂所溶解。用超声波提取斑蝥素时，气体的存在意义十分突出，基于这一考虑，提取前省去了浸泡步骤，以便尽可能保留斑蝥体内气体成分。此外，超声波被吸收的难易与其频率亦有密切关系，频率愈高，愈容易被吸收 [2] ，至于两者对斑蝥素提取的有无影响，尚有待于进一步实验研究。
实验结果表明，超声波提取法完全可以替代煎煮法用以提取斑蝥素。两者比较，煎煮法所需时间长，加之斑蝥体内脂肪等有机物在NaOH作用下，加热后产生强烈恶臭，况且煎煮液十分粘稠，滤过困难。用超声代替煎煮提取斑蝥素便克服了上述不足，故其有十分广阔的应用前景。
参考文献
1 张振凌，王正益，孙水平，等.斑蝥不同炮制品药理作用的研究.中国中药杂志，1990，15(4):25.
2 庄鸣山.物理学.第二版.北京:人民卫生出版社，1991，106-107.
基金项目:国家“十五”科技攻关项目子课题(编号:2001BA701A07-10)
作者单位:510317广东广州解放军第177中心医院
(编辑曲 全), 百拇医药(梅清华 林壮民)
关键词 斑蝥素 超声提取法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)22-3059-02
Possibility of Catharidin’s extraction by ultrasound
Mei Qinghua，Lin Zhuangmin
177Hospital of Chinese PLA，Guangzhou510317.
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【Abstract】 Objective To study the possibility of Catharidin’s extraction by ultrosound.Methods NaOH solution as solvent，the extractive rate of Catharidin by800kHz irradiation45min(30min+15min)was compared with by reflux method extraction90min(60min+30min).Results Some mistakes of reflux method was overcomed while the extrative rate no changed(P>0.05).Conclusion Ultrasonic extraction was much better than reflux method.Key words catharidin ulrasonic extraction
斑蝥是我国中药中最早被发现有抗癌作用的药物，其活性成分为斑蝥素，它对多种癌细胞有较强的抑制和破坏作用。有人用低浓度NaOH溶液煎煮处理来提取斑蝥素获得成功 [1] ，由于该法缺点甚多，故笔者对超声波提取斑蝥素的可行性进行了实验研究。
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1 仪器与试剂
JY92-Ⅱ型超声波细胞粉碎机:宁波新芝科器有限公司;岛津GC-14B，C-R7A气相色谱仪;斑蝥:经广州中医药大学鉴定的南方大斑蝥;NaOH、丙酮为分析纯;色谱用试剂均为色谱纯。
2 方法与结果
2.1 斑蝥素的提取
2.1.1 超声提取法 称取斑蝥10g，置入10倍量0.5%NaOH溶液中。将超声波发生器之换能器插入其中，用800kHz超声波提取30min，滤过，残渣再加10倍量上述溶剂，同法提取15min，滤过，合并滤液，将之浓缩成每10ml相当于1.0g生药备用。同法再作两份。
2.1.2 煎煮法 取斑蝥10g，在10倍量0.5%NaOH溶液中浸泡30min，加热至100℃提取60min，滤过，残渣再用同法提取30min，滤过，合并，将滤液浓缩成每10ml相当1g生药备用。共作三份。
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2.2 含量测定方法
2.2.1 色谱条件 CBP-1(25m×0.25mmI.D)色谱柱，氢火焰离子化检测器，N 2 (20ml/min，130kPa)，H 2 (65kPa)，AIR(65kPa)，柱温:170℃，进样口温度:210℃，检测器温度:250℃。
2.2.2 对照品溶液配制 精密称取斑蝥素对照品6mg于5ml容量瓶中加丙酮定容，得浓度为1.2mg/ml的对照品溶液。
2.2.3 供制品溶液制备 精密吸取斑蝥素提取液10ml，HCl调至pH2，氯仿萃取三次(20ml，15ml，15ml)合并氯仿液，水浴蒸干，残渣丙酮溶解，定容至1ml即得。
2.2.4 含量测定 取对照品溶液0.8μl，供试液2μl，进行气相色谱分析，外标法计算含量(斑蝥素保留时间约5.85min)，见表1。
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表1 斑蝥素提取率 (%)
3 讨论
超声波对不同物态的穿透性存在很大差别，实验证明，若在同样条件下使超声波强度衰减一半，需穿透液体的距离较穿透空气的距离大1000倍 [2] 。也就是说，超声波对液态穿透能力强，其能量在液态中不易被吸收;对气态穿透能力差，其能量在气体中极易被吸收。根据超声波的这一特性可将其用于斑蝥素的提取，由于超声波所具备的巨大能量几乎不为溶媒所吸收，当遇到斑蝥虫体内的孔隙时，能量便大量释放，使斑蝥虫体裂解，细胞破坏，斑蝥素被溶剂所溶解。用超声波提取斑蝥素时，气体的存在意义十分突出，基于这一考虑，提取前省去了浸泡步骤，以便尽可能保留斑蝥体内气体成分。此外，超声波被吸收的难易与其频率亦有密切关系，频率愈高，愈容易被吸收 [2] ，至于两者对斑蝥素提取的有无影响，尚有待于进一步实验研究。
实验结果表明，超声波提取法完全可以替代煎煮法用以提取斑蝥素。两者比较，煎煮法所需时间长，加之斑蝥体内脂肪等有机物在NaOH作用下，加热后产生强烈恶臭，况且煎煮液十分粘稠，滤过困难。用超声代替煎煮提取斑蝥素便克服了上述不足，故其有十分广阔的应用前景。
参考文献
1 张振凌，王正益，孙水平，等.斑蝥不同炮制品药理作用的研究.中国中药杂志，1990，15(4):25.
2 庄鸣山.物理学.第二版.北京:人民卫生出版社，1991，106-107.
基金项目:国家“十五”科技攻关项目子课题(编号:2001BA701A07-10)
作者单位:510317广东广州解放军第177中心医院
(编辑曲 全), 百拇医药(梅清华 林壮民)
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